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以下是雞β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒的實驗說明書核心內容整理:
BS-4389 雞β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒
一、檢測原理
采用雙抗體夾心法,通過預包被的雞IFN-β抗體捕獲樣本中的目標蛋白,再與HRP標記的檢測抗體結合形成復合物,經TMB顯色系統反應后,450nm波長下測定OD值,顏色深度與IFN-β濃度成正比。
二、試劑盒組成
預包被微孔板?:96孔或48孔規格(抗雞IFN-β抗體包被)
標準品?:6濃度梯度(常見范圍:25-800pg/mL或15.625-1000pg/mL)
酶標抗體?:HRP標記的檢測抗體
顯色系統?:TMB底物A/B液
終止液?:2M硫酸溶液
濃縮洗滌液?:20×或30×需稀釋使用
三、樣本處理要求
血清/血漿?:3000rpm離心10-30分鐘,避免溶血
細胞培養上清?:直接離心去除顆粒物
組織勻漿?:按重量比加入PBS勻漿后離心取上清
保存條件?:-20℃分裝,避免反復凍融
四、操作步驟
平衡試劑?:所有組分室溫平衡20-30分鐘
加樣?:標準品/樣本按50-100μL/孔加入
孵育?:37℃反應30-60分鐘,洗滌3-5次
顯色?:加入TMB避光反應10-15分鐘
終止與檢測?:加終止液后立即測定450nm OD值
五、關鍵參數
檢測范圍?:2-48ng/L或15.625-1000pg/mL(不同品牌有差異)
靈敏度?:檢測限5.7pg/mL
精密度?:板內/板間變異系數<10%
有效期?:6-12個月(2-8℃保存)
六、注意事項
不同批次試劑不可混用
顯色時間需嚴格控制,強光會干擾結果
加樣需保持速度一致,避免孔間時間差過大
酶標板開封后需密封防潮保存
完整操作請以試劑盒內附說明書為準,部分品牌提供免費代測服務。
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